透射电镜细胞样品制备实验报告

纳瑞科技（北京）有限公司(Ion Beam Technology Co.,Ltd.)成立于2006年，是由在聚焦离子束（扫描离子显微镜）应用技术领域有着多年经验的技术骨干创立而成。

透射电镜是一种广泛用于观察微小物体的显微镜,可以对细胞和组织进行高分辨率、高对比度的成像。话说回来, 制备透射电镜细胞样品需要一系列的前期处理步骤,以确保样品具有高纯度和适当的形态,从而能够获得最佳的成像效果。本文将介绍透射电镜细胞样品制备的实验报告。

1. 实验目的

本实验的目的是制备适合于透射电镜成像的细胞样品。具体来说,旨在通过以下步骤获得高质量的细胞样品:

(1)通过酶解法去除细胞中的细胞骨架和大分子蛋白质,以减少对成像的干扰。

(2)使用乙醇沉淀细胞内的脂质,以使细胞更加透明。

(3)使用透射电镜成像,获得高质量的细胞样品。

2. 实验材料

(1)细胞:人胚肾上皮细胞( human kidney epithelial cells,HREC)

(2)酶:胶原蛋白酶( collagenase)、蔗糖酶( glucose-starved ischemia-rehydration,GRIR)、胰蛋白酶( trypsin)

(3)试剂:乙醇、透射电镜成像系统、聚乙二醇(PEG)

3. 实验步骤

(1)收集细胞

将HREC细胞培养在37°C的培养箱中,取出后用胰蛋白酶处理,分散成单个细胞,并用乙醇沉淀10分钟。

(2)处理细胞

将沉淀的细胞用胶原蛋白酶处理10分钟,去除细胞骨架。将细胞放入透射电镜成像系统中,使用聚乙二醇(PEG)将细胞稀释至适当的浓度,以获得最佳成像效果。

(3)透射电镜成像

将透射电镜成像系统置于荧光灯下,对细胞进行成像。使用透过性较好的载玻片,以便细胞样品能够透过光线进入成像系统。在成像前,使用透射电镜对样品进行预处理,以去除空气泡和颗粒物。使用合适的物镜和目镜,以获得最佳成像效果。

(4)分析

使用透射电镜成像系统采集了3个视野的图像。使用图像处理软件对获取的图像进行预处理,以去除噪声和背景。接着,使用透射电镜成像系统对细胞样品进行成像,并获得高质量的细胞样品。

4. 实验结果

使用透射电镜成像系统获得了HREC细胞的样品。通过预处理步骤,细胞样品具有高纯度和适当的形态,获得了最佳的成像效果。

5. 实验总结

本实验描述了制备透射电镜细胞样品的实验过程。通过使用一系列的前期处理步骤,包括酶解法、乙醇沉淀、透射电镜成像,获得高质量的细胞样品。这些步骤确保了细胞样品具有高纯度和适当的形态,从而能够获得最佳的透射电镜成像效果。

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